沉降?菌、浮游菌監測?點設置相關法規簡潔整理篇！
發布時間：2023-01-16 瀏覽次數：915
USP29-1116
| 表1 基于控制環境重要性的建議取樣頻率 | |
| 樣地面積 | 取樣頻率 |
| 潔凈級100或更好的設計室 | 每個操作交接 |
| 剛靠近潔凈級100的支持區 (如10,000潔凈級) | 每個操作交接 |
| 其它支持區(100,000潔凈級) | 每周兩次 |
| 潛在的產品/容器接觸區 | 每周兩次 |
| 其它無菌操作區但非產品接觸區支持區(100,000潔凈級或較低) | 每周一次 |
由于操作過程中手工介入的增加以及人員接觸產品潛在性的增加，使得環境監測程序的相對重要性增加。
環境監測對于無菌操作生產的產品來說，遠比生產后進行終端滅菌的產品要重要得多。
確定和定量對后繼滅菌處理具有抗性的微生物，遠比在制造環境周圍進行微生物環境監測要重要得多。
如果終端滅菌循環不是基于過度殺傷循環，而是基于生物負擔優先滅菌，那么生物負擔的評估就是關鍵性的。
取樣策略應當是動態性的，即監測頻率和取樣策略位置的動態性。其動態調整是以趨勢特征為根據的。根據這一趨勢可以進行適當的增加或減少取樣。
醫藥工業潔凈室（區）沉降菌的測試方法
GB/T 16294-2010
5.4 沉降菌計數
5.4.1 采樣點數目及其布置
5.4.1.1 最少采樣點數目
沉降法的最少采樣點數可按表2確定。
| 表2 最少采樣點數目 | |||
| 面積m2 | 潔凈度級別 | ||
| 100 | 10 000 | 10 0000 | |
| <10 | 2～3 | 2 | 2 |
| ≥～<20 | 4 | 2 | 2 |
| ≥～<40 | 8 | 2 | 2 |
| ≥40～<100 | 16 | 4 | 2 |
| ≥100～<200 | 40 | 10 | 3 |
| ≥200～<400 | 80 | 20 | 6 |
| ≥400～<1000 | 160 | 40 | 13 |
| ≥1000～<2000 | 400 | 100 | 32 |
| 2000 | 800 | 200 | 63 |
注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指的是送風面面積，對非單向流潔凈室是指的房間面積。
在滿足最少測點數的同時，還宜滿足最少培養皿數，見表3。
| 表3 最少培養皿數 | |
| 潔凈度級別 | 所需?90mm培養皿數（以沉降0.5h 計） |
| 100 | 14 |
| 10 000 | 2 |
| 100 000 | 2 |
| 300 000 | 2 |
5.4.1.2 采樣點的布置
采樣點的位置可以同懸浮粒子測試點。
（a）工作區采樣點的位置離地0.8m～1.5m左右（略高于工作面）。
（b）可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加采樣點。
潔凈室施工及驗收規范 GB 50591-2010
E.8 懸浮微生物的檢測
E8.3 沉降菌檢測應符合下列要求：
1、使用直徑90mm(φ90)的培養皿采樣。當采用其他直徑培養皿時，應使其總面積和φ90皿總面積相當。
2、培養皿中灌注胰蛋白酶大豆瓊脂培養基，必須留樣作陰性對照。
3、培養皿表面應經適當消毒清潔處理后，布置在有代表性的地點和氣流擾動極小的地點。在亂流潔凈室內培養皿不應布置在送風口正下方。
4、當用戶沒有特定要求時，培養皿應布置在地面及其以上0.8m之內的任意高度。
5、每一間潔凈室或每一個控制區應設1個陰性對照皿。
6、動態監測時也可協商布點位置和高度。
7、培養皿數應不少于微粒計數濃度的測點數，如工藝無特殊要求應大于等于表E.8.3中的最少培養皿數，另外各加一個對照皿。
GMP附錄 一 無菌藥品
第十一條 應當對微生物進行動態監測，評估無菌生產的微生物狀況。監測方法有沉降菌法、定量空氣浮游菌采樣法和表面取樣法（如棉簽擦拭法和接觸碟法）等。動態取樣應當避免對潔凈區造成不良影響。成品批記錄的審核應當包括環境監測的結果。
對表面和操作人員的監測，應當在關鍵操作完成后進行。在正常的生產操作監測外，可在系統驗證、清潔或消毒等操作完成后增加微生物監測。
| 表4 潔凈區微生物監測的動態標準 | ||||
| 潔凈度級別 | 浮游菌 cfu/m3 | 沉降菌（90?mm） cfu /4h | 表面微生物 | |
| 接觸（?55mm） cfu /碟 | 5指手套 cfu /手套 | |||
| A級 | ＜1 | ＜1 | ＜1 | ＜1 |
| B級 | 10 | 5 | 5 | 5 |
| C級 | 100 | 50 | 25 | — |
| D級 | 200 | 100 | 50 | — |
注：（1）表中各數值均為平均值；（2）單個沉降碟的暴露時間可以少于4小時，同一位置可使用多個沉降碟連續進行監測并累積計數。
第十二條 應當制定適當的懸浮粒子和微生物監測警戒限度和糾偏限度。操作規程中應當詳細說明結果超標時需采取的糾偏措施。
歐盟《GMP》附錄1 無菌藥品生產2008版
17、下表列出了各級區內示例性生產操作（可參見第28條至第35條）
| Grade | 最終滅菌產品的生產操作（參見28 — 30條） |
| A | 高污染風險產品的灌裝 |
| C | 高污染風險藥液的配制，藥液的灌裝 |
| D | 灌裝前原輔包裝材料的準備、藥液的配制 |
| Grade | 無菌操作（參見31 — 35條） |
| A | 無菌配制和灌裝 |
| C | 過濾前藥液的配制 |
| D | 清潔后原輔包裝材料的處理 |
當實施無菌操作時，應經常的對微生物進行動態監測，監測方法有沉降碟法、定量空氣采樣法和表面取樣法（如：藥簽擦拭法和接觸碟法）等。動態取樣須避免對潔凈區造成不良影響。
在成品批檔案審核，應同時考慮環境監測的結果，決定是否放行。
表面和操作人員的監測，應在關鍵操作完成后進行。
除生產操作之外，還需進行其他微生物監控，例如在系統驗證、清潔和消毒操作后。
19、潔凈區微生物監控的動態參考標準如下：
| 微生物污染限度參考標準 | ||||
Grade級別 | (空氣樣) cfu/m3 | 沉降碟(?90 mm) cfu/4h (b) | 接觸碟(?55 mm) cfu/碟 | 5指手套 cfu/手套 |
| A | ＜1 | ＜1 | ＜1 | ＜1 |
| B | 10 | 5 | 5 | 5 |
| C | 100 | 50 | 25 | — |
| D | 200 | 100 | 50 | — |
注：(a)表中各數值均為平均值； (b) 單個沉降碟的暴露時間可以少于4小時。
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