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唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米面亞種）檢驗解決方案
發布時間：2020-09-10 瀏覽次數：6888 分享：
今年8月，廣東省一家腸粉店發生食物中毒，11名顧客吃了店內河粉后，出現嘔吐、腹瀉等癥狀，送醫后1人搶救無效去世，2人病情較重，其余人員暫無生命危險。
經調查，這起食物中毒的罪魁禍首是“椰毒假單胞菌”，中毒原因是因為某些菌株可以產生一種叫“米酵菌酸”的毒素，一旦吃了含有這種毒素的食物，就會表現為惡心、嘔吐、腹瀉、頭暈、全身無力，嚴重時會出現黃疸、肝腫大、皮下出血、嘔血、驚厥抽搐等癥狀，最嚴重的會出現休克甚至死亡。
“椰毒假單胞菌”，全稱椰毒假單胞酵米面亞種Pseudomonas cocovenenans subsp. Farinofermentans，是一種存在于酵米面、變質鮮銀耳及其他淀粉類發酵產品中的食源性致病菌，
由于椰毒假單胞酵母菌酵米面亞種不是國際公開發表和承認的細菌分類科學名稱，1999年劃分為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Burkholderia gladioli的一個病原型，目前現行標準GB/T 4789.29-2003《食品衛生微生物學檢驗 椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗》。2018年9月國家衛生健康委員會發布的《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米面亞種）檢驗（征求意見稿）》中，將該菌進行更名，同時新增分離培養基mPDA同PCFA用于唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米面亞種）的分離。
具體檢驗流程如下：
1. 檢驗流程（前增菌以及選擇性分離過程）
2. 檢驗流程初篩實驗
自選擇性瓊脂平板上分別挑取5個以上典型或可疑菌落，分區劃線卵黃瓊脂平板，36℃±1℃培養。挑取培養18～24 h的菌落進行革蘭氏染色及氧化酶試驗。對于革蘭氏染色陰性、氧化酶試驗陰性的菌繼續培養至48 h±2 h，對于卵磷脂酶陽性，帶有虹彩環的單個菌落，接種PDA平板，36℃±1℃培養24 h±2 h。
（環凱貨號027162）卵黃瓊脂（卵磷脂酶試驗）
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌恒溫熒光擴增試劑盒快速檢測法
1. 技術原理：利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的BstDNA聚合酶，使模板兩端引物結合處循環出現環狀單鏈結構，引物順利與模板結合并進行鏈置換擴增反應，實現在恒溫條件下（60~65℃）進行連續快速擴增。反應加入顯色指示劑，陰陽性結果顯色差異顯著，可直接通過顏色變化判讀結果。
2. 產品優勢
操作簡便：簡單加樣操作，快速上手；
快速省時：獲得菌液后1 h完成檢測
靈敏度高：最低檢測限8CFU。
特異性強：利用靶基因序列上的多個獨立區域設計多條引物，保證擴增反應的高度特異性
結果簡單可視：肉眼觀察顏色，可判斷結果。
“+”代表陽性；“-”代表陰性
3. 產品組分：
組分名稱 規格×數量 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌檢測試劑（凍干） 3排× 8管 復溶液 650 μL × 1管 陽性對照（凍干） 1管 陰性對照（凍干） 1管 裂解液 1 mL × 1管 顯色指示劑 80 μL×1管 超純水 1 mL×1管 說明書 1份
4. 過程圖解：
5. 產品結果
“+”代表陽性；“-”代表陰性
相關產品信息
用途 | 產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 |
快速檢驗和鑒定 | KJD16L | 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌核酸快速檢測試劑盒 核酸快速檢測試劑盒 | 24測試/盒 |
選擇性增菌 | 021055 | GVC增菌液 | 250g/瓶 |
分離培養 | 021054 | 改良馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基（mPDA） | 250g/瓶 |
021059 | PCFA培養基基礎 | 250g/瓶 | |
SR0690 | PCFA培養基配套試劑 | 10支/盒 | |
卵磷脂酶試驗 | 027161 | 卵黃瓊脂基礎（適應GB4789.29-2003） | 250g/瓶 |
卵磷脂酶試驗 | 027162 | 卵黃瓊脂基礎（適應GB4789.29修訂意見稿） | 250g/瓶 |
純培養 | 021057 | 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基 | 250g/瓶 |
形態觀察 | 029010 | 革蘭氏染色液 | 4種×10mL/盒 |
氧化酶試驗 | 029172 | 氧化酶試劑 | 50測試/盒 |
動力試驗和產毒素試驗 | 021056 | 馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂 | 250g/瓶 |
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